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发布时间:2022-05-10 10:43:34
大肠在生物技术中的应用
大肠是人和许多动物肠道中且数量的一种***,周身鞭毛,能运动,无芽孢。主要生活在大肠内。
1、大肠是***,属于原核生物;具有由肽聚糖组成的细胞壁,只含有核糖体简单的细胞器,没有细胞核有拟核;细胞质中的质粒常用作***工程中的运载体。
2.大肠的代谢类型是异养兼性厌氧型。
3.***与大肠的关系:在不致病的情况下(正常状况下),可认为是互利共生(一般高中阶段认为是这种关系);在致病的情况下,可认为是寄生。
4.培养基中加入伊红美蓝遇大肠,菌落呈深紫色,并有金属光泽,可鉴别大肠是否存在。
5.大肠在生物技术中的应用:大肠作为外源***表达的宿主,遗传背景清楚,技术操作简单,培养条件简单,大规模发酵经济,倍受遗传工程的重视。目前大肠是应用,成功的表达体系,常做表达的体系。
6.大肠在生态系统中的地位,假如它生活在大肠内,属于消费者,假如生活在体外则属于分解者。
7.它的***组DNA为拟核中的一个环状分子。同时可以有多个环状质粒DNA。
8.大肠细胞的拟核有1个DNA分子,长度约为4 700 000个碱基对,在DNA分子上分布着大约4 400个***,每个***的平均长度约为1 000个碱基对。
9、大肠的代谢类型是异养兼性厌氧型。
大肠菌群的菌落计数检验方法
大肠菌群的菌落计数
检验方法
用灭菌吸管吸取待检样液1.0mL,加入无菌平内。每个样品接种三个连续稀释度,每个稀释度接种两个平皿。于每个加样平内倾注15mL45~50℃的Aiiz-gal琼脂,迅速轻轻转动平,使混合均匀。待琼脂深固后,再倾注3mL-5mL Aliz-sal琼脂覆盖表面。同时将Aliz-gal琼脂倾人加有1mL上述无菌磷酸盐缓冲液(或生理盐水)的无菌平皿内作空白对照。待琼脂凝固后,翻转平板,干37+1℃培养箱培养18h-24h。取出平板,计数紫色(或红色)菌落。
培养基检验原理:胰酪胨提供碳氮源、***和矿物质满足***生长的需求;氯化钠可维持均衡的渗透压;磷酸二氢钾和磷酸氡二钾是培养基pH缓冲剂:月桂基***钠可***革兰氏阳性菌的生长;大肠菌群可产生-半乳糖苷酶,分解液体培养基中的酶底物茜素-B-D-半乳糖苷(Aliz-gal),使素游离并与固体培养基中的铝、钟、铁、钱离子结合形成坚备(或红色)的罄合物,使菌落呈现相应的颜色。
大肠菌群检测的关键在于方法的选用
调查研究表明,大肠菌群多存在于温血动物粪便、人类经常活动的场所以及有粪便污染的地方。人、畜粪便对外界环境的污染是大肠菌群在自然界存在的主要原因之一,粪便中多以典型大肠为主,而外界环境中则大肠菌群的其他菌株较多。大肠菌群检测的关键在于方法的选用,食品中大肠菌群检测有两种表示方法,其一是以100mL(g)检样内大肠菌群可能数(MPN)表示,检测方法需使用GB/T 4789.3-2003《食品卫生微生物学检验大肠菌群测定》;其二以每g(mL)样品中大肠菌群的MPN值表示,检测方法需使用GB 4789.3-2016《食品安全食品微生物学检验 大肠菌群计数》。
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